Очень часто определение группы крови выполняется цоликлонами. Цоликлоны подразделяются на анти-А и анти-В. Их использование в медицине популярно из-за возможности определения не только группы крови. Резус они также демонстрируют. Для этого используется система АВО, которая заменяет обычные сыворотки, основой которых является агглютинирующий изогем.
Чтобы определить группу или резус, реагентами осуществляется поиск указанных выше антигенов, которые присутствуют в эритроцитах. Для этого применяются антитела стандартного типа. Также стандартными эритроцитами выявляются агглютины, вне зависимости от того, используется плазма или специальная сыворотка для исследования. Когда речь идет об анализе донорских образцов, требуется в обязательном порядке определить также и присутствие в сыворотке агглютининов. Применяются для этого эритроциты стандартного типа.
В качестве основы цоликлонов используются гибридомные линии клеток. Получаются они в результате совмещения антителообразующих В-лимфоцитов мышиного происхождения с клетками миеломы того же живого организма. С помощью гибридомов, которые являются индивидуальными, продуцируются антитела гомогенного типа. При этом может быть в итоге только один иммуноглобулический класс. Эти вещества почти полностью повторяют структуру и активность с биологической точки зрения.
Содержание:
Подготовка к работе
Чтобы определить цоликлонами группу крови и резус, существует специальный алгоритм. Такая техника работы предполагает лабораторное определение. В лаборатории должны поддерживаться определенные температурные показатели – в пределах от 15 до 25 градусов по Цельсию. Кроме этого, требуется хорошее освещение.
Для хранения всех реагентов используются плотно закрытые сосуды. Это необходимо, чтобы не допустить высыхания. В результате этого процесса может серьезно снизиться активность антител.
Для работы запрещено пользоваться мутными с присутствием хлопьев реагентами. Используется для работы индивидуальная пипетка. Для проведения процедуры предполагается использование планшета, окрашенного в белый цвет с хорошо смоченной поверхностью. За счет такого фактора, как высокая авидность и активность цоликлонов, достаточно одной реагентной серии для использования.
Чтобы выполнить исследование на группу крови, предварительно нужно подготовить все оборудование и реагенты. В частности:
- подготавливается типовая тарелочка, сухая, на ней будет выполняться весь анализ;
- подготавливаются цоликлоны обоих типов, а также две пипетки для работы с каждым по отдельности и две палочки, выполненные из стекла, которыми выполняется перемешивание;
- потребуется одноразовый шприц с иглой, которой осуществляется забор крови.
В лоток, прошедший стерилизацию, выкладываются три шарика, которые предварительно смачиваются спиртом, а также три стерильные салфетки. Для забора потребуется резиновый жгут. Сбор осуществляется в пробирку центрифужного типа без какой-либо жидкости. На ней с помощью стеклографа требуется отчетливо прописать фамилию пациента. Кроме этого, заполняется бланк, который служит лабораторным направлением. Врач-лаборант повторно определит все основные показатели и поставит печать и подпись.
Определение результатов
Чтобы получить верный результат анализа, требуется провести внутривенную пункцию с соблюдением всех правил по забору. Достаточно для определения будет пяти миллилитров.
Цоликлоны анти-А и анти-В в условиях лаборатории наносятся на планшеты. Потребуется одна большая капля. Каждая помечается соответствующими надписями. Рядом с ними необходимо нанести капли крови в небольшом количестве.
Индивидуальная палочка из стекла служит для перемешивания образца и реагентов. Соотношение крови к реагентам должно составлять один к десяти. Для наблюдения реакции достаточно двух с половиной минут.
Всего пяти минут при помешивании капель достаточно для наблюдения результата. Он должен быть оценен врачом. Таблица, расположенная ниже, содержит результаты, на которые стоит ориентироваться при работе с сывороткой при использовании эритроцитов стандартного типа.
| Реакция исследуемых эритроцитов с цоликлонами | Исследуемая кровь принадлежит к группе | |
| анти-А | анти-В | |
| – | – | 0(I) |
| + | – | A(II) |
| – | + | B(III) |
| + | + | AB(IV) |
Если определяется группа крови АВ у новорожденных для исключения аутоагглютинации, то требуется контрольное исследование. Для этого одна капля изотонического раствора хлористого натрия смешивается в указанной выше пропорции с кровью, направленной на исследование. Если реакции агглютинации нет, то кровь действительно соответствует группе АВ.
Для определения резус-фактора алгоритм подготовки используется тот же самый. После того, как все предметы для определения резус-фактора готовы, выполняется исследование.
Для этого на планшет требуется нанести большую каплю реагента анти-D-супер. Рядом в той же пропорции один к десяти наносится капля крови, отправленной на исследование. С помощью индивидуального инструмента производится смешивание реагента и крови, затем оценка результата.
Если процесс агглютинации начался, то кровь имеет положительный резус-фактор, если процесс не начинается, соответственно, речь идет об отрицательном резус-факторе. Стоит подчеркнуть, что у моноклональных реагентов имеются некоторые преимущества в сравнении со стандартными сыворотками. В частности, результат в таком случае куда точнее, а сама процедура более безопасная, безболезненна и не отнимает много времени.
Загрузка...
